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            植物花青素合成酶(ANS)ELISA試劑盒

            簡(jiǎn)要描述:植物花青素合成酶(ANS)ELISA試劑盒本生生物公司供應:ELISA試劑盒,血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器。

            • 產(chǎn)品型號:BS-8058
            • 產(chǎn)       地:天津市
            • 更新時(shí)間:2024-07-31
            • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:80
            詳細介紹
            品牌其他品牌產(chǎn)地國產(chǎn)
            級別其他規格96T/48

              植物花青素合成酶(ANS)ELISA試劑盒實(shí)驗原理

              本試劑盒應用雙抗體夾心法測定樣品指標水平。樣品包括血清血漿尿液腦脊液細胞固體組織等,用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入樣品,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中濃度,或者與CUTOFF值相比較,從而判定標本陰陽(yáng)性。

              BS-8058  植物花青素合成酶(ANS)ELISA檢測試劑盒  96T/48T

              ELISA試劑盒組成

              1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶

              2 酶標試劑 6ml×1瓶

              3 酶標包被板 12孔×8條

              4 樣品稀釋液 6ml×1瓶

              5 顯色劑A液 6ml×1瓶

              6 顯色劑B液 6ml×1/瓶

              7 終止液 6ml×1瓶

              8 標準品 0.5ml×1瓶

              9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

              10 封板膜 2張

              樣品收集、處理及保存方法

              1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉 離心10分鐘將血清和紅細胞迅速 小心地分離。

              2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

              3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

              4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

              5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在 室溫下解凍并確保樣品均勻地充 分解凍。

              樣本要求

              1.樣本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

              2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

              植物花青素合成酶(ANS)ELISA試劑盒操作步驟

              1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照隨貨說(shuō)明書(shū)中圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

              2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

              3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

              4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

              5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

              6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

              7.溫育:操作同3。

              8.洗滌:操作同5。

              9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

              10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。

              11.測定:以空白孔調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

              計算

              以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線(xiàn),根據樣品的OD值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實(shí)際濃度。

              

            植物花青素合成酶(ANS)ELISA試劑盒


              植物花青素合成酶(ANS)ELISA試劑盒注意事項

              1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

              2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。

              3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

              4.請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

              5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

              6.底物請避光保存。

              7.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

              8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

              9.本試劑不同批號組分不得混用。

              10.保存2-8℃。

              11.有效期:6個(gè)月

             


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