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            對于ELISA試劑盒操作程序,本生詳解如下

            更新時(shí)間:2023-05-06    點(diǎn)擊次數:1254

              對于ELISA試劑盒操作程序,本生詳解如下:


            1. 分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最后稀釋度為5倍)。每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動(dòng)混勻,37℃溫育60分鐘。


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              2. 棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。

              3. 每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

              4. 取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。

              5. 測定:以空白孔調零,在450nm波長(cháng)下測量各孔的吸光度值(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

              6. 根據elisa試劑盒免費代測標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來(lái)計算。應記住由于樣品稀釋了的,其實(shí)際濃度應該乘以總稀釋倍數。

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